水产养殖用弧菌培养基(水产养殖用弧菌培养基有哪些)
1. 水产养殖用弧菌培养基有哪些
水产八大菌中,硝化细菌、光合细菌、芽孢杆菌、放线菌、乳酸菌、酵母菌、霉菌、蛭弧菌等八种菌为水产动物体内常见菌群。其中,硝化细菌、光合细菌和芽孢杆菌属于净水菌,乳酸菌、酵母菌、霉菌、蛭弧菌属于改水菌,而放线菌没有水质净化作用,因此不属于水产八大菌。
在水产养殖过程中,水质会直接影响水产生物的健康和生存。因此,选择合适的水产八大菌来调节水质非常重要。一般来说,芽孢杆菌、光合细菌、乳酸菌等三种菌属于改水菌,能够快速改善水质,提高水产生物的成活率。硝化细菌、酵母菌、霉菌等三种菌属于净水菌,能够缓慢净化水质,但是对水产生物没有明显的危害。而蛭弧菌则属于双面菌,即在水质极坏时也会裂解有害菌种,但因其不属于水产养殖行业常规使用菌种,故不在八大菌之内。
综上所述,水产八大菌中属于碱性菌的有芽孢杆菌和硝化细菌。光合细菌和乳酸菌属于中性菌,而酵母菌、霉菌和蛭弧菌属于酸性菌。选择合适的菌种可以根据水质情况和养殖需求进行调整,以达到最佳的养殖效果。
2. 水产弧菌测试盒图解
对虾绿弧菌爆发处理方式如下:
对虾弧菌感染最佳处理方法
1.降盐度 (1)由于弧菌在高盐低盐的环境下不容易进行大量繁殖,所以可以通过降低盐度抑制弧菌繁殖。 (2)一般来苗时盐度是20,一天可以降低3个盐度,将盐度降到10左右即可。 (3)然后再根据当地的水体盐度,一天升3个盐度,直到和养殖用水盐度一样即可。
2.加大换水量 加大换水量可以将水中的弧菌排出,换新水后,还可以稀释弧菌。
3. 水产弧菌在什么情况下不能生存
消毒方法:消毒可以完全消除弧菌,但消毒是杀死所有细菌。如果没有其他真菌的抑制,弧菌很快就会卷土重来。
2.
弧菌吞噬作用:通过食用细菌控制弧菌
3.
细菌抑制:通过喷洒维诺复合益生菌抑制弧菌,增加水中有益细菌的数量。用于解决水产养殖中最困难的问题。
4. 水产养殖用弧菌培养基有哪些品牌
TCBS琼脂培养基,英文名称Thiosulfate citrate bile salts sucrose agar culture medium,即硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基。用途:用于霍乱、副溶血性弧菌的分离培养。用法:称取本品 8.9g,煮沸溶解于100ml 蒸馏水中,冷至 60℃时, 倾入无菌平皿 ,无需高压灭菌。
5. 水产弧菌培养基的使用方法
TCBS是一种选择性和差异性寡碱基培养基,用于分离和鉴定海洋中的弧菌属和副溶血弧菌属。TCBS培养基的名称来源于它的组成成分:胆盐、胆红素、蔗糖和盐(Taurocholate-Citrate-Bile-Sucrose agar)。
它包含了一些抑制其他细菌的物质,如氧化还原指示剂和钠离子,使得弧菌属菌株能够生长和形成独特的黄绿色或蓝绿色菌落。
6. 水产养殖用弧菌培养基有哪些品种
荧光弧菌是一种常见的水生细菌,通常在海洋和淡水中生长。为了分辨养殖荧光弧菌,可以采取以下方法:
1.观察颜色:荧光弧菌在黑暗环境下会发出绿色或蓝色荧光,因此可以通过肉眼观察是否有特殊的发光现象来判断是否存在荧光弧菌。
2.细菌培养:将样品放入富含营养物质的培养基中,观察培养基上是否有荧光红龙虾线圈等特征性斑点出现,这些斑点通常由荧光弧菌产生。
3.形态学观察:通过高倍显微镜观察细胞形态、大小、运动性等特征来进行初步鉴定。
4.PCR技术:采用聚合酶链反应技术对样品进行检测并鉴定荧光弧菌的存在与否。
总之,要准确分辨是否存在荧光弧菌,需要多种方法结合使用,并且要进行专业实验室检测以确认其准确性。
7. 水产养殖弧菌标准
1、食品、食品添加剂、食品相关产品中的致病性微生物、农药残留、兽药残留、生物毒素、重金属等污染物以及其他危害人体健康物质的限量规定
目前,我国已制定系列食品安全国家标准对食品中污染物质以及其他危害人体健康物质的限量指标进行了规定。其中,《食品中致病菌限量》(GB 29921-2013)对肉制品、水产制品、即食蛋制品、粮食制品、即食豆类制品、巧克力类及可可制品、即食果蔬制品、饮料、冷冻饮品、即食调味品、坚果籽类制品等食品中沙门氏菌、单核细胞增生李斯特氏菌、大肠埃希氏菌O157:H7、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌5种致病菌限量规定。《食品中农药最大残留限量》(GB 2763-2014)对蔬菜、水果、谷物、油料和油脂、糖类、调味品、饮料、食用菌、肉类、蛋类等12大类387种农药进行了限量规定,涉及3650项农药限量指标。《食品中真菌毒素限量》(GB 2761-2017)规定了水果及其制品、谷物及其制品、豆类及其制品、坚果及籽类、乳及乳制品、油脂及其制品、调味品、饮料类、酒类、特殊膳食用食品10大类食品中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素M1、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、展青霉素、赫曲霉毒素A及玉米赤霉烯酮的限量指标。《食品中污染物限量》(GB 2762-2012)规定了铅、镉、汞、砷、苯丙[α]芘、N-二甲基亚硝胺等
8. 水产养殖用弧菌培养基有哪些种类
发酵实验流程:先配制18L营养肉汤液体培养基,121℃灭菌
20min。冷却后接种,由于条件所限,摇床的
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温度为30℃而非最适的37℃,180r/min,培养48小时。培养结束后,对培养液进行离心(3000r/min,10min),倒掉上清液,加入适量的生理盐水,振荡使菌泥破碎溶于液体中。重复以上过程2次后,所得即为高浓度大肠杆菌菌悬液,保藏于4℃冰箱。发酵罐用蒸馏水清洗后,加6L蒸馏水空灭一次,排掉蒸馏水。把溶氧电极浸没于新鲜配制的饱和无水亚硫酸钠溶液中,待电极显示值稳定后标零点。标定结束后将溶氧电极插入相应的传感器接口,固定连接数据线,在发酵接种前标定满度。PH电极的标定应在灭菌前进行,用PH=6.86的缓冲液标定零点,用PH=9.18的缓冲液标定斜率。标定结束后将PH电极插入相应的传感器接口,固定连接数据线。打开蒸汽发生器准备灭菌,先向外套内通如热蒸汽,等罐内温度升到100℃以上时,向罐内通
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热蒸汽使温度上升到121℃,进入灭菌记时。灭菌1800s,这个过程中通过调节蒸汽阀门和排气阀来控制罐压和罐温。灭菌流程结束后,停止向罐内通热蒸汽,同时关闭蒸汽发生器。此时发酵罐冷却过程开始,系统通过控制电磁阀的开启使冷水进入夹套,对发酵罐进行降温冷却。降温过程结束后设定发酵过程的各项参数,包括温度、转速、罐压,由于发酵罐内装的是已经调完PH的生理盐水(PH约为7),而且并未开启酸碱泵,所以设定的参数只有以上三个。温度设定为30℃,转速设定为150r/min,罐压为0.05MPa。待温度、罐压、通气量均已保持稳定正常下,以100%标定溶氧值,此时溶解氧是一个稳定的相对值。所有参数设定完毕,开始加样。把浸过酒精的火环放在加样口,点燃火环开始加样。把事先制备的保藏
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于4℃冰箱的高浓度大肠杆菌菌悬液加到发酵罐中,再加入蛭弧菌样品,旋紧加样口的金属塞,加样完毕开始发酵。加样过程中应防止染菌,最重要的是加蛭弧菌时加样应迅速通过火环,因为蛭弧菌对热很敏感,温度过高会使其灭活。
这次发酵流程一共用时72小时,每12小时取样一次。与同等时间的摇床样品共同做吸光光度值(OD值)测定,对裂解大肠杆菌的速度进行对比。但由于发酵罐取样口的总阀门有泄露现象,使取样前用于管道灭
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菌的的高压蒸汽进入发酵罐内,造成取出的样本产生较大误差,蒸汽进入发酵罐后使发酵液温度上升,对蛭弧菌生长产生不利影响。同时蒸汽管路中的铁锈也随热蒸汽进入发酵罐内,对OD值的测定产生干扰。由于高压热蒸汽进入罐内造成罐压变化,使溶氧电极所测定的溶氧值也产生不稳定的波动,PH电极测定的数值也由于同样的原因出现不正常波动,所以整个发酵过程所记录的溶氧值和PH值与真实值有很大误差,不建议采用。
由于取样口总阀门泄露造成发酵液流失严重(6min就泄露了
100ml),发酵流程结束时发酵液仅存不到3L。用发酵液制作双层平板可以观察到噬菌斑,但出斑时间比发酵前蛭弧菌样品出斑时间要长而且出斑数量减少。
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总结:由于发酵罐泄露在事先并无征兆,造成出现状况后没有妥善的办法处理问题,使得取样所得样品失去测定价值,同时热蒸汽的渗入也使得罐内温度变化较大,对蛭弧菌的生长很不利。当所做的双层平板证明这次发酵液中蛭弧菌数量小而且活性低时,我们打电话进行了咨询,决定在下次上罐时做一些改进。
蛭弧菌侵入宿主细菌的方式十分独特,开始时以很高的速度(每秒高达100个细胞单位)猛烈碰撞宿主细胞,无鞭毛端直接附着于宿主细胞壁上,然后菌体以100转/秒以上的转速产生一种机械钻孔效应,加上蛭弧菌入侵时的收缩而进入宿主细胞的周质空间。蛭弧菌的端生鞭毛是赋予其这些生理特性的关键!如果发酵罐的叶浆转速过高时会对蛭弧
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菌的端生鞭毛造成致命破坏,使得蛭弧菌无法攻击宿主细胞,这直接导致蛭弧菌活性减弱,宏观上就表现为噬菌斑出斑慢,出斑少。
通过咨询我们还得知大肠杆菌可以在灭菌前加入,即把大肠杆菌与生理盐水共同加热,使大肠杆菌死亡。由于死亡的大肠杆菌菌体细胞结构已造破坏,细胞膜通透性改变,使得蛭弧菌侵入菌体的难度降低了,这样就可以使蛭弧菌增殖的速度变快,发酵时间变短,这对现实生产很重要。
所以我们在第二次发酵需要做的改进有:一、发酵罐的转速要降下来,咨询时对方建议我们把转速降到0,但因为我们的发酵罐搅拌方式是叶浆式的(对方是气升式的),所以经研究决定转速暂定于
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50r/min。 二、大肠杆菌在灭菌之前加入到发酵罐中,与生理盐水一同加热。灭菌后再加入蛭弧菌样品进行发酵。
第二次发酵流程
发酵过程:先配制30L的牛肉膏蛋白胨液体培养基,121℃灭菌
20min,冷却后接种。摇床30℃ 160r/min培养48小时,培养结束后
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4000r/min离心10min,加入适量生理盐水振荡,再离心10min,重复两次,最后加入生理盐水制成高浓度菌悬液,置于4℃冰箱保藏。这个过程与第一次发酵相同。由于10L小发酵罐泄露情况仍未得到修复,所以发酵使用的是100L大发酵罐。大罐长期无人使用积垢严重,用适量稀盐酸浸泡后用大量自来水冲洗。待其内部铁锈和霉斑冲洗干净后加入蒸馏水空灭一次。空灭结束后,把配制好的30L生理盐水倒入发酵罐中。把溶氧电极浸没于新鲜配制的饱和无水亚硫酸钠溶液中,待电极显示值稳定后标零点。标定结束后将溶氧电极插入相应的传感器接口,固定连接数据线,在发酵接种前标定满度。PH电极的标定应在灭菌前进行,用PH=6.86的缓冲液标定零点,用PH=9.18的缓冲液标定斜率。标定结束后将PH电极插入相应的传感器接口,固
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定连接数据线。打开蒸汽发生器准备灭菌,先向外套内通如热蒸汽,等罐内温度升到100℃以上时,向罐内通热蒸汽使温度上升到121℃,进入灭菌记时。灭菌1800s,这个过程中通过调节蒸汽阀门和排气阀来控制罐压和罐温。灭菌流程结束后,停止向罐内通热蒸汽,同时关闭蒸汽发生器。此时发酵罐冷却过程开始,系统通过控制电磁阀的开启使冷水进入夹套,对发酵罐进行降温冷却。降温过程结束后设定发酵过程的各项参数,包括温度、转速、罐压,由于发酵罐内装的是已经调完PH的生理盐水(PH约为7),而且并未开启酸碱泵,所以设定的参数只有以上三个。这次发酵的参数与上次唯一的不同就是转数了,这次转数设定为50r/min,上次为150r/min,温度仍设定为30℃,罐压0.05MPa。待温度、罐压、通气量均已保持
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稳定正常下,以100%标定溶氧值,此时溶解氧是一个稳定的相对值。所有参数设定完毕,开始加样。把浸过酒精的火环放在加样口,点燃火环开始加样。把事先制备的保藏于4℃冰箱的高浓度大肠杆菌菌悬液加到发酵罐中,再加入蛭弧菌样品(上次的培养液,约为1.5L),旋紧加样口的金属塞,加样完毕开始发酵。加样过程中应防止染菌,最重要的是加蛭弧菌时加样应迅速通过火环,因为蛭弧菌对热很敏感,温度过高会使其灭活。
这次发酵过程为132小时,在发酵48小时后取出发酵液约10L。
9. 水产养殖中弧菌的检测实验
1、外用泼洒方法
① 直接泼洒强微乳酸丁酸拌料宝(主要成分是乳酸菌)
但成本比较高,我们在育苗场使用强微乳酸丁酸拌料宝泼洒于水体,即便是水体弧菌超标,在使用强微乳酸丁酸拌料宝0.5克/立方米水体的用量时,水中的弧菌基本消失,全部抑制住。
方法是溶解于水,直接泼洒于水中。
② 用强微乳酸丁酸拌料宝培养乳酸菌发酵液泼洒水体
取100克即一包强微乳酸丁酸拌料宝 ,加红糖15~20公斤,加强微水产苷0.5公斤,加水200~300公斤,在25度以上的温度下,静置培养两天即可用(每天搅拌一次),培养结束时,发酵液可达到10亿/毫升以上的含量。
使用时,每亩水面泼洒这种发酵液10公斤即可完全抑制弧菌。
使用成本,以上制作成本,按零售价计算为1元/公斤的成本,每亩使用成本为10元/亩,但效果肯定,且显著抑制有害藻类如蓝藻的发生,促进水体嫩爽,促进老藻分解,新藻繁殖,水色变好;并保证水色夏天20天以上,冬天45天以上;
在广东有一些养殖户,一包强微乳酸丁酸拌料宝,加红糖20公斤,加强微水产苷1公斤,加水500公斤来培养3~4天,也成功,最终PH达到4左右,即算成功,并出售给周围的养殖户使用,效果反馈非常的显著。
③ 泼洒强微降氨靓水乳酸菌相
现在出了新产品,强微降氨靓水乳酸菌相,使用成本低,抑制弧菌,链球菌,大肠杆菌效果好,按产品的使用说明来使用,如果想完全抑制弧菌和链球菌等,一包强微降氨靓水乳酸菌相用于2亩,救命时只用1亩,用2公斤红糖加30公斤水,浸泡一小时以上后,全池均匀泼洒即可。
④ 泼洒保苗救急乳酸菌相
这也是一个新产品,用来救命用的,但也可以平时用来抑制弧菌和链球菌,以及大肠杆菌,只是使用成本高一些,一包用于3亩,用2公斤红糖加30公斤水,浸泡一小时以上后,全池均匀泼洒即可。
2、内服使用方法
① 直接内服乳酸丁酸拌料宝,强微水产苷配合使用
每100公斤对虾饲料中,添加强微乳酸丁酸拌料宝一包100克,添加强微水产苷50克;可以彻底控制抑制对虾体内的弧菌危害,和罗非鱼体内链球菌危害。
但本方法对水体中弧菌和链球菌的控制力比较弱一些,毕竟用量不够,例如一亩虾塘,一天只喂5公斤料的话,只需要强微虾偷乐5克,所以,对整体一亩水体来说,通过内服,再通过对虾排泄的粪便中的乳酸菌,水中增加的乳酸菌并不多,对水体的弧菌和链球菌的抑制作用有限。
② 发酵豆粕,或发酵鱼虾类饲料
方法是,一包强微乳酸丁酸拌料宝,加一包强微豆粕发酵剂(或一包活力99生酵剂、或半包强微99生酵剂、或半包强微无抗饲料发酵剂),用来发酵豆粕(或发酵对虾饲料,或发酵普通鱼饲料)400公斤,加水240公斤,搅拌均匀后,密封发酵3~5天,产生曲香,酸香味为止,PH4~5左右。
在这里,既利用了强微乳酸丁酸拌料宝中的高含量乳酸菌,也利用了强微豆粕发酵剂(或活力99生酵剂、或强微99生酵剂、或强微无抗饲料发酵剂)中的发酵功能,对豆粕进行了强烈的发酵,产生大量的乳酸菌和小肽,同时,分解了豆粕,提高了豆粕的利用率,并产生了甘露寡糖,是乳酸菌的伴侣,显著抑制鱼虾体内外的弧菌和链球菌。
注意这里是用强微乳酸丁酸拌料宝,与强微的发酵剂配合使用的,发酵剂可以选择:1.强微豆粕发酵剂;2.活力99生酵剂;3.强微99生酵剂;4.强微无抗饲料发酵剂;中的任何一种,效果上以强微豆粕发酵剂最好,强微无抗饲料发酵剂第二,强微99生酵剂第三,和活力99生酵剂次之。
喂法:以上述发酵饲料折干20%,搭配未发酵的对虾或鱼类饲料80%来喂鱼虾即可。
注意折干的概念:如果发酵饲料含水量为40%左右,如果一次喂料10斤折干料,则按上述配比,可取发酵料湿的料3.2斤(相当于折干只有2斤),取鱼虾饲料8斤,混合后喂鱼虾就可以了;
方法,既可以抑制水体中的弧菌和链球菌,又可以抑制鱼虾体内的弧菌和链球菌,也是目前对虾养殖中,比较公认的好方法,即发酵饲料的方法;
养殖户可以慢慢增加发酵料的用量,例如我们推荐最高发酵料用量为占一半,即发酵料折干一半50%,鱼虾饲料一半50%,例如一次喂10斤的,可取发酵料湿的料8斤,取鱼虾饲料5斤,混合后喂鱼虾即可。
10. 水产弧菌有什么特效药
冷冻带鱼如果有病菌病毒那么就不好吃了,冷冻水产一定要经过卫生检疫部门检疫,这样才能保证食品安全,所以到超市要看冷冻检验检疫证明。
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